Типовая программа ВЭЖХ курса 

   для отделов исследований и разработок

  Новости и анонсы компании  

Доступны новые и обновленные программы ВЭЖХ КУРСОВ. Найдите в брошюре о наших ВЭЖХ курсах промо-код и получите одно бесплатное участие в одном из наших вебинаров по ВЭЖХ.

04.10.2021

Доступны новые и обновленные программы ВЭЖХ КУРСОВ. Найдите в брошюре о наших ВЭЖХ курсах промо-код и получите одно бесплатное участие в одном из наших вебинаров по ВЭЖХ.

Брошюра по ВЭЖХ курсам, 2021-2022 гг.

Типовая программа ВЭЖХ курса

для отделов НИР

Опциональные модули

ВЭЖХ курса

ТИПОВАЯ ПРОГРАММА ВЭЖХ КУРСА
ДЛЯ ОТДЕЛОВ ИССЛЕДОВАНИЙ И РАЗРАБОТОК (3 дня)

​

Общий курс ВЭЖХ. Разработка ВЭЖХ методик. Основы трансфера и валидации ВЭЖХ методик. Правильная эксплуатация ВЭЖХ оборудования и колонок

​

* программа может быть изменена или дополнена по желанию Заказчика
** программа может быть дополнена практической частью по желанию Заказчика

​

День 1. Общий курс ВЭЖХ

​

1. Специфичность ВЭЖХ методики. Специфичность хроматографического разделения и специфичность детектирования. Классификация хроматографических методик согласно их назначению. Таргетные (рутинные) и нетаргетные (скрининговые) методики; целевое применение изократического и градиентного способов элюирования.
2. Обзор способов детектирования в ВЭЖХ. Оптические, испарительные, электрохимические и масс-селективные детекторы, их специфичность и области применения. Как выбрать оптимальные условия детектирования.

3. Основные параметры ВЭЖХ разделения. Факторы, определяющие разрешение пары пиков, и их оптимальные значения. Оптимальное удерживание. Оптимальная селективность. Оптимальная эффективность.
4. Общая последовательность разработки ВЭЖХ методик. Что должно быть получено на каждом из этапов разработки, и какие знания (навыки) для этого необходимы.
5. Базовые адсорбционные (RP, NP, HILIC, IC, CT, LEC) и эксклюзионные (SEC, IEX) режимы жидкостной хроматографии.
6. Смешанные режимы, часто применяющиеся при анализе лекарственных средств: RP/HILIC, RP/IC, RP/CT, RP/SEC, HILIC/IC, NP/CT.
7. Прогнозирование хроматографического поведения соединения в каждом из хроматографических режимов по его структурной химической формуле.

День 2. Разработка ВЭЖХ методик

8. Обращенно-фазовый (RP) механизм удерживания. Регулирование удерживания в обращенно-фазовом режиме. Корректные способы регулирования селективности в обращенно-фазовом режиме. Преимущества и недостатки обращенно-фазовой хроматографии. Специфика обращенно-фазовых разделений с МС детектированием.
9. Нормально-фазовый (NP) и гидрофильный (HILIC) механизмы, их сходства и различия. Регулирование удерживания в нормально-фазовом режиме. Три эмпирических правила для регулирования селективности в нормально-фазовом режиме. Преимущества и недостатки нормально-фазовой хроматографии.
10. Ионный (IC) механизм удерживания. Регулирование удерживания в ионном режиме. Корректные способы регулирования селективности в ионном режиме. Преимущества и недостатки ионной хроматографии. Как разработать МС-совместимую методику в ионном режиме.
11. Регулирование удерживания в гидрофильном (HILIC) режиме. Корректные способы регулирования селективности в гидрофильном (HILIC) режиме. Правильное кондиционирование ВЭЖХ колонок в гидрофильном (HILIC) режиме; как разработать робастное гидрофильное разделение. Специфика гидрофильных разделений с МС детектированием.

12. Обзор коммерчески доступных неподвижных фаз для ВЭЖХ. Типы коммерчески доступных неподвижные фаз для обращенно-фазовой, гидрофильной, ионной и хиральной ВЭЖХ. Поверхностно-пористые неподвижные фазы, их преимущества и недостатки. Эволюция неподвижных фаз для ВЭЖХ. Современные тренды в разработке неподвижных фаз для ВЭЖХ. Основные производители неподвижных фаз для ВЭЖХ. Структура современного рынка ВЭЖХ колонок.

Основы трансфера и валидации ВЭЖХ методик

13. Подбор ВЭЖХ колонки, «аналогичной данной». Что значит «аналогичная колонка». Типичные ошибки при выборе ВЭЖХ колонки для выполнения измерений по имеющейся ВЭЖХ методике. L-классификация неподвижных фаз по USP: насколько она полезна для выбора аналога? Работающая на практике классификация неподвижных фаз для ВЭЖХ и алгоритм подбора аналогичной ВЭЖХ колонки.

14. Валидационные характеристики. Способы подтверждения специфичности. Принцип выбора хроматографических характеристик для подтверждения робастности.

День 3. Разработка ВЭЖХ методик (продолжение). Основы трансфера ВЭЖХ методик. Правильная эксплуатация ВЭЖХ оборудования и колонок

15. Гидродинамика ВЭЖХ колонки и закон Дарси. Теория скоростей и уравнение Ван-Деемтера. Вид зависимости Ван-Деемтера для различных типов неподвижных фаз.
16. Эффективность, производительность, запас по давлению и импеданс колонки как ресурсы ВЭЖХ разделения на этапе его оптимизации; общий вид взаимосвязи этих параметров.
17. Общая схема выбора оптимальной скорости потока. Эффективность-оптимальная, средневзвешенная и производительность-оптимальная скорости потока.
18. Общая схема выбора оптимальной длины колонки и размера частиц.

19. Внеколоночные факторы уширения пика.  Внеколоночные объемы ВЭЖХ оборудования и их влияние на хроматографическое разделение. Проблема с перегрузкой колонки количеством вещества в старых ВЭЖХ методиках. Химические причины уширения пика; химическая инертность неподвижных фаз как критичная характеристика, влияющая на асимметрию ВЭЖХ пиков. Оптимизация ВЭЖХ разделения с учетом влияния внеколоночных факторов уширения пика.

20. Почему ВЭЖХ методики могут не воспроизводиться (не проходить трансфер). Трансферабельность ВЭЖХ методики. Из чего она состоит. Трансферабельность как пользовательская характеристика ВЭЖХ методики. Критические характеристики качества, входящие в состав трансферабельности. Возможные причины неуспеха трансфера изократических ВЭЖХ методик. Возможные причины неуспеха трансфера градиентных ВЭЖХ методик. Типичные проблемы с воспроизведением устаревших ВЭЖХ методик и ВЭЖХ методик, взятых из открытых (в том числе официальных) источников. Отличительные черты устаревших ВЭЖХ методик.

21. Если методика не воспроизвелась – что делать дальше? Как скорректировать методику для успешного трансфера, не меняя текста ВЭЖХ методики и хроматографических условий. Как можно скорректировать ВЭЖХ методику для успешного трансфера, изменяя хроматографические условия в рамках, допустимых Фармакопеей. Особенности трансфера фармакопейных ВЭЖХ методик

22.1. Что подразумевается под качеством колонки. Какую колонку можно считать качественной. Качество упаковки и качество адсорбционного материала.
22.2. Какие признаки свидетельствуют о нарушениях в технологии упаковки колонок.
22.3. В каких случаях можно попытаться заменить непригодную колонку у производителя.
22.4. Как в долгосрочной перспективе обезопасить себя от покупки некачественных ВЭЖХ колонок.
 
23.1. Как начинать работу с новой обращено-фазовой колонкой.
23.2. Какого объема подвижной фазы достаточно для кондиционирования новой обращенно-фазовой колонки.
23.3. Чем промывать обращено-фазовые колонки. Миф: колонку необходимо часто промывать, тогда она проживет дольше.
23.4. Можно ли сократить время, затрачиваемое на промывки колонок.
23.5. Какие предосторожности необходимо соблюдать при промывке колонок.
23.6. В чем можно хранить обращено-фазовые колонки.

24.1. От чего обращено-фазовые колонки выходят из строя. Как надежно установить, что колонка вышла из строя и не подлежит восстановлению.
24.2. Причины естественного износа обращенных фаз. Средние сроки эксплуатации колонок на силикагельной и полимерной основах различного типоразмера.
24.3. Способы продления срока эксплуатации колонок.
24.4. Можно ли регенерировать ВЭЖХ колонки.
24.5. Можно ли работать на “перевернутых” колонках.

Дни 4-5: опциональная практическая часть

​

25. Работа на приборе, разработка и трансфер ВЭЖХ методик.

​

​

​

ОПЦИОНАЛЬНЫЕ МОДУЛИ ВЭЖХ КУРСА

ДЛЯ ОТДЕЛОВ ИССЛЕДОВАНИЙ И РАЗРАБОТОК

1. Экономическая эффективность ВЭЖХ лаборатории

Аналитическая лаборатория как звено производственной цепочки. Применение теории ограничений к управлению аналитической лабораторией. Практические подходы по увеличению экономической эффективности деятельности лабораторий. Аналитическая лаборатория как центр прибыли.

2. Управление смешанными ВЭЖХ режимами

Техника работы со смешанными режимами. Переключение режимов путем варьирования состава подвижной фазы. Особенности работы со смешанными режимами со вкладом обращенно-фазового механизма.

​

3. Ион-парные режимы

3.1. Динамическое модифицирование в ВЭЖХ. Ион-парные режимы. Ион-парная обращенно-фазовая хроматография, ее преимущества и недостатки. Способы коррекции удерживания и селективности в ион-парном режиме.

3.2. Проблемы трансфера методик в ион-парном режиме, способы их устраниения (минимизации). Правильное кондиционирование неподвижных фаз при работе в ион-парном режиме. Типичные ошибки при работе с ион-парными разделениями.

​

4. Твердофазная экстракция (ТФЭ)

4.1. ТФЭ как предельный вариант жидкостной хроматографии. Разница ТФЭ и адсорбционной очистки. Основные термины ТФЭ: кривая проскока, кривая смыва, емкость адсорбента. Офф-лайн и он-лайн ТФЭ.

4.2. Техника работы с ТФЭ.

4.3. Основные типы адсорбционных материалов для ТФЭ.

4.4. Три основные задачи прободготовки для ТФЭ. Выбор тактики при разработке ТФЭ методик. Правильное сочетание режима для проведения ТФЭ и аналитического метода для конечного определения (ГХ, ОФ ВЭЖХ, НФ ВЭЖХ и т.д.).

4.5. Двумерная «heart-cut» хроматография как предельный случай он-лайн ТФЭ. On-column и off-column концентрирование пробы между двумя колонками в «heart-cut» ВЭЖХ.

​

5. Хиральная ВЭЖХ

5.1. Обзор коммерчески доступных неподвижных фаз для хиральной ВЭЖХ.

5.2. Основные закономерности хирального разделения. Способы регулирования селективности хирального разделения.

​

6. Основы трансфера ВЭЖХ методик

6.1. Обеспечение прослеживаемости ВЭЖХ измерения. Основы квалификации ВЭЖХ оборудования. Типовые тесты основных узлов ВЭЖХ комплекса. Квалификация протокола обработки данных. Тестирование ВЭЖХ колонок.

6.2. Основы валидации ВЭЖХ методик. Валидационные характеристики. Различные способы установления специфичности определения. Особенности валидации робастности. Протокол валидации робастности. Критерии пригодности хроматографического разделения.

6.3. Основные типичные проблемы при трансфере ВЭЖХ методик и способы их минимизации.​

​

Заявку на проведение ВЭЖХ курсов (в свободной форме) можно отправить на электронный адрес sales@hplc.today. Ждем Вас!

​